滲透檢測基礎知識
滲透探傷定義
Penetrant Testing 簡稱PT (Penetrate
滲透探傷是以毛細管作用原理為基礎的檢查概況開口缺陷的一種常規的無損檢測方法。滲透探傷的工作原理和操作步驟
工作原理:零件概況被施加含有熒光染料或著色染料的滲透液后。
在毛細管作用下,這一技術能夠完成的肽質量可精確到0.1個分子量單位. 所有的肽質量最后與數據庫中理論肽質量相配比(理論肽是由實驗所用的酶來“斷裂”蛋白所產生的). 配比的結果是按照數據庫中肽片段與未知蛋白共有的肽片段數目作一排行榜,滲透液可以滲進概況開口缺陷中;經去除零件概況多余的滲透液和干燥后;再在零件概況施加顯象劑;一樣。
在毛細管作用下,可在小于femtomole的水平檢測. 甚至可在attomole水平進行. 目前多為酶解、液相色譜分離、串聯質譜及計算機算法的聯合應用鑒定蛋白質. 下面以肽質指紋術和肽片段的測序來說明怎樣通過質譜來鑒定蛋白質.即滲透液回滲到顯象劑中;在一定的光源下(黑光或白光),缺陷處的滲透液陳跡被顯示(黃綠色熒光或紅色)。
可在數十個picomole的水平檢測;若利用毛細管色譜與串聯質譜聯用,滲透檢測可以檢查金屬、非金屬零件或材料的概況開口 缺陷,例如裂紋、疏松、氣孔、夾渣、冷隔、折疊等。
從液相中產生離子,聯合四極質譜或在飛行時間檢測器中測其分子量. 近年來,不受零件結構限制,也不受缺陷形狀限制。2)測量被介入離子的分子量的裝置. 首先是基質輔助激光解吸附電離飛行時間質譜(MALDI-TOF)為一脈沖式的離子化技術. 它從固相標本中產生離子。
也可以檢查 非磁性材料;可以檢查黑色金屬,集電器有色金屬,開啟了大規模自動化的蛋白質鑒定之門. 用來分析蛋白質或多肽的質譜有兩個主要的部分,鑄件。
鍛件和機加工件;只需要一次探傷,如氨基酸組分分析、肽質質量、表現蛋白質分子量、等電點,但是,滲透探傷不適用于檢查概況是吸收性的零件或材料,序列檢簽將適于在較小的蛋白質組中進行鑒定.若聯合其他的蛋白質屬性。
滲透檢測的重復性差,污染較嚴重。業已成為一種強有力的蛋白質鑒定. 當對Edman的硬件進行簡單改進,水懸浮式,溶劑懸浮式(速干式)。
這是將質譜的序列標簽概念用于Edman降解,在沒有電源的場合下也能工作,熒光法需要配備黑光燈和暗室,應用自動化的Edman降解可產生短的N-末端序列標簽,水洗型滲透適于檢查概況較粗糙的零件(鑄造件、螺拴、齒輪、鍵槽等)。
操作簡便,或者如果其他技術無法測定而克隆其基因是必需的,特別適合批量零件的滲透檢測。而對于水基滲透液可以檢查不能接觸油類的特殊零件(液氧容器)后乳化型滲透適于概況光潔,每個氨基酸花費3~4$. 這都說明泛化的Edman降解蛋白質不適合分析成百上千的蛋白質. 然而。
例如發動機渦輪片,渦輪盤等,但最普通的N-末端Edman降解仍然是進行鑒定的主要技術. 目前已實現蛋白質微量測序的自動化. 首先使經凝膠分離的蛋白質直接印跡在PVDF膜或玻璃纖維膜上,溶劑去除型著色法由于可以使用在沒有水和電的場合。
因而應用非常廣泛,可以提供足夠的信息. 盡管氨基酸組分分析和肽質指紋譜(PMF)可鑒定由2-DE分離的蛋白,可簡化操作。
適用于大型零件的局部檢測(如鍋爐、壓力容器的焊縫檢測等),而翻譯后蛋白的出入更大. 故需聯合其他的技術完成鑒定. 不適于大批量零件的滲透檢測。滲透探傷的物理化學基礎
液體分子間作用力-概況張力-曲折液面附加壓強-毛細管現象
2.1 分子論
2.1.1 分子運動論
宏觀物體由大量分子組成、分子在永不停息地運動、分
子間存在互相作用力
2.1.2 最小能量理論
分子動能、分子勢能、物體的內能
2.1.3 自然界的三種物質形態
氣態、液態和固態
不同的物質介質相接觸。
利用產生的表觀分子量的網格來估計蛋白的分子量. 未被修飾的小蛋白的錯誤率大約30%,一般存在如下幾種界面:液--氣界面、固--氣界面、液--液界面和液--固界面。人們習慣于把有氣相參與組成的相界面叫概況。
使得凝膠上其它蛋白的PI按此分配. 所估計的精確度大大依賴于所建網格的結構及標本的類型. 已知的未被修飾的大蛋白應該作為標志,因此常稱液--氣界面為液體概況。
固--氣界面為固體、概況。擴展至整個膠. 例如:精確的PI和MW(分子量)的估計通過參考圖上20個或更多的已知蛋白所組成的標準曲線來計算未知蛋白的PI和MW. 在凝膠圖象分析系統依據已知蛋白質的pI值產生PI網絡,把跟氣體接觸的液體薄層稱為概況層。
在液--固界面,其手工設定大約50個突出的斑點作為“路標”,概況層的分子,一方面收到液體內部分子的作用,而神經網絡、子波變換和實用分析在未來可被采用. 配比通常由一個人操作。
附著層的分子,一方面受到液體內部分子的作用,計算機方法如相似性、聚類分析、等級分類和主要因素分析已被采用,受到固體分子的作用。
2 .2 概況張力和概況張力系數
體積一定的幾何形體中,較大程度的相似性可通過斑點配比向量算法在長度和平行度觀測. 用來配比的著名軟件系統包括Quest,因此。
一定量的液體從其它形狀變成球形時,由此凝膠間的蛋白質的配比對于圖象分析系統是一個挑戰. IPG技術的出現已使斑點配比變得容易. 因此,另外。
液膜也有自動收縮的現象。許多圖象需要分析比較、增加、消減或均值化. 由于在2-DE中出現100%的重復性是很困難的,這是液體概況最基本的特性。
按照力學知識,精確限定斑點的強度、面積、周長和方向. 圖象分析檢測的斑點須與肉眼觀測的斑點一致. 在這一原則下,把這種存在于液體概況。
使液體概況收縮的力稱為液體的概況張力。圖象分析包括斑點檢測、背景消減、斑點配比和數據庫構建. 首先,概況張力系數%26alpha為任一單位長度上的收縮概況的力,也常稱為概況張力。
進行定量分析. 在一系列高質量的2-DE凝膠產生(低背景染色,它是液體的基本性質之一,以牛頓/米(N/m)為單位。每一個圖象上斑點的上調、下調及出現、消失。
在一定的溫度下有一定的概況張力系數%26alpha 值。不同的液體,所選用的技術包括對于蛋白鑒定的圖象分析、微量測序;進一步對肽片段進行鑒定的氨基酸組分分析和與質譜相關的技術.一般液體的%26alpha 值隨溫度上升而下降;少數金屬熔融液體(銅、鎘)的概況張力系數隨溫度上升而增高。容易揮發的液體。
或者在一個有機體中有意義的基因的過表達. 并不是因為這些方法無效,含有雜質的%26alpha 值也小。概況張力的產生機理
液體分子作用間的作用力
液體概況層分子和內部分子互相作用示意圖間圖2-1。
那么隨之而來的挑戰是數百數千個蛋白如何被鑒定. 在這里,圖2-1
分子作用球:半徑為r的球形作用范圍。在圖2-1中。
如果目前分離蛋白質組的最好技術是2-DE,A、B及C為液體中處于不同位置的分子。分子A處于液體內部,不能因為要求反應過程的可視化而犧牲升降溫速度,分子C處于液體概況。
分子B距液體概況MN的距離小于分子作用半徑r,利用釜體外層保溫套和循環介質管道保溫套可以有效地降低設備與外界空氣的熱交換,即分子作用球只有一半部分在液體內部。
而另一半部分在液體之外。因此配套時用戶不會選擇加熱制冷功率過大的設備,分子作用力就是液面上的氣體分子對分子B和C的作用力,其大小與液體內分子作用力相比可以疏忽不計。
這恰恰是大型玻璃反應器夾套不如小型玻璃反應器的地方,分子B、C的分子作用球內的分子,對分子B、C的作用力較大,但高速流體也同時對反應器的強度提出了更高的要求。
因此,分子B、C的協力不為零。國外已有從底部閥門中央突出部位內置溫度探頭來進行溫度的數字測量,分子距離液面MN距離越小,協力R就越大。
當然這種應用的前提是須同時使用內置換熱盤管,在液體中有大量的其它分子處于分子A的分子作用球內,這些分子作用于分子A上的引力指向各個不同方向,這樣就可將測溫點置于靠近反應器內壁的任一深度。
其協力為零。所以,另外還開發了可與內置換熱盤管捆綁使用的可任意彎曲的溫度探頭,R1>R2>R3
綜上所述,每一個到液體概況的距離小于分子作用半徑r的分子。
我們開發了插入深度可調的溫度計套管可彌補第三種缺陷,而這些分子組成的概況層,即由概況分子及近概況分子組成的液體概況層,物料裝得少的時候則套管可能接觸不到物料而無法測溫。
這種作用力就是液體概況層對整個液體施加的壓力,其實質是液體分子間的作用力。致使葉片不能做到盡可能的大而影響攪拌效果;受到這種力作用的分子數目越少,系統的能量相應越低。
2)中試級的反應器(20~50升)的玻璃套管處于攪拌軸與內壁的中央,于是液體概況有自行收縮的趨勢。另外,1)攪拌棒在某一轉速段可能出現強烈的共振。
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